
時間:2020-07-17 16:40:00 瀏覽:10301次
穩定細胞系在重組蛋白制備、抗體制備、藥物篩選、基因功能研究及其它方面起著重要作用。穩定細胞系能持續生長,并持續穩定表達外來基因。根據研究或應用方向,可通過改變插入的拷貝數及啟動子活性,調控外源基因在靶細胞的表達水平,使其升高、降低、或與靶細胞內源基因表達量相等。外源基因的插入方式可分為隨機插入,或插入定點位置。
威斯騰生物現為廣大研究者提供穩定細胞系構建服務,使用最先進技術水平,為您提供高質量的穩定細胞系。構建服務可使用復能基因提供的 CHO、HEK293、Hela、NIH3T3等工具細胞,也可使用客戶指定的特定細胞系。從克隆構建、細胞系建立、基因擴增、單克隆篩選、細胞系鑒定、到功能研究,全方位的實驗選擇可滿足研究者對蛋白表達、基因沉默等多種科研需求。
選擇威斯騰生物哺乳動物穩定細胞系構建服務,您可以:
1)自由選擇基因插入方式
2)自由選擇克隆載體
3)自由選擇靶細胞系
4)自由選擇擴增基因或調整蛋白表達量
基因敲入技術一直是研究特定基因功能的有效工具。威斯騰生物利用最新的CRISPR/Cas系統可以有效的實現對細胞系特定基因的敲入。
我們利用該技術,定點敲入各種細胞系中的特定基因。對打靶細胞進行藥物篩選,利用CRISPR/Cas系統獲得的基因敲入細胞的剔除效率會明顯高于常規的利用RNAi和shRNA介導的基因敲落。
技術特色
1、可實現多個靶基因位點及多個基因的同時敲入
2、最新Nickase酶/雙gRNA技術,顯著降低脫靶率
3、無種屬限制,適用于各種細胞系的靶向敲入
操作流程
靶向目標序列sgRNA的設計及載體構建
目標細胞系共轉染
陽性細胞株的篩選和鑒定
參考細胞系
腫瘤細胞系: BEL-7402人肝癌細胞 CNE人鼻咽癌細胞 Hela人宮頸癌細胞 MCF-7人乳腺癌細胞等
神經細胞系:SK-N-SH人神經母瘤細胞
卵巢細胞系:SK-OV-3人卵巢癌細胞
血管平滑肌細胞系:VSMC血管平滑肌
成纖維細胞系:包皮成纖維細胞,心肌成纖維細胞
肺細胞系:SK-MES-1人肺鱗癌細胞 NCI-H460人大細胞肺癌細胞 A549人非小細胞肺癌細胞
腎細胞系:NRK腎小球足細胞
巨噬細胞:MH-S小鼠肺泡巨噬細胞 RAW 264.7小鼠單核巨噬細胞白血病細胞 THP-1人單核巨噬細胞
內皮細胞:HUVEC人臍靜脈內皮細胞
......
具體CRISPR /Cas9細胞建系技術定制服務,歡迎聯系我們。
威斯騰實驗服務流程
威斯騰生物服務項目
分子生物學檢測 | 蛋白質與免疫學 | 動物實驗 |
實時熒光定量PCR | 單克隆抗體制備 | 帕金森疾病模型 |
免疫共沉淀(Co-IP) | 多克隆抗體制備 | 抑郁癥動物模型 |
ELISA(酶聯免疫吸附法)技術 | Western-blot 實驗服務 | 脊髓損傷模型 |
生化指標檢測 | 蛋白雙向電泳實驗服務 | 腦外損傷模型 |
雙熒光素酶報告基因檢測 | 原核蛋白表達純化 | 骨神經損傷模型 |
染色質免疫共沉淀(ChIP) | 真核蛋白表達純化 | 心肌缺血模型 |
GST pull Down | ITRAQ定量蛋白質組學 | 心力衰竭模型 |
SLAC蛋白組學 | 肺動脈高血壓動物模型 | |
高血壓模型 | ||
病毒包裝 | 實驗課題整體外包 | 粥樣動脈硬化模型 |
過表達/干擾慢病毒包裝純化 | 整體課題外包 | 大腦中動脈阻塞模型 |
過表達/干擾腺病毒包裝純化 | 細胞整體實驗外包 | 慢性之氣管炎模型 |
逆轉錄病毒包裝純化 | 動物整體實驗外包 | 過敏性哮喘模型 |
腺相關病毒包裝純化 | 肺炎大鼠模型 | |
肝炎-肝硬化-肝癌模型 | ||
蛋白芯片 | 原代細胞培養 | 肝纖維化模型 |
細胞因子芯片 | 骨髓間充質干細胞培養 | 膽結石模型 |
BioPlex懸浮芯片 | 脂肪干細胞培養 | 急性胰腺炎模型 |
生長因子芯片 | 心肌成纖維細胞培養 | 急性腎衰竭模型 |
炎癥因子芯片 | 軟骨細胞培養 | 體內血栓模型 |
血管生成因子芯片 | 血管內皮細胞培養 | 關節炎模型 |
凋亡因子芯片 | 神經元細胞培養 | I型和II型糖尿病模型 |
趨化因子芯片 | 內皮組細胞原代培養 | 裸鼠成瘤 |
HuProt TM 20K人類蛋白組芯片 | 基因編輯動物 | |
電生理相關服務 | 動物整體實驗服務 | |
膜片鉗實驗 | ||
細胞生物學檢測 | 高通量測序 | 代謝組學 |
細胞原代培養 | mRNA測序 | 氣相色譜GC/MS |
MTT檢測 | LncRNA測序 | 液相色譜LC/MS |
細胞凋亡檢測 | 全基因組測序 | 核磁共震NMR |
細胞周期檢測 | RNA-Seq測序 | |
細胞克隆形成實驗 | 外顯子測序 | 影像學相關實驗 |
Transwell細胞遷移/侵襲 | 16s擴增子測序 | Micro-CT |
流式分選 | Small RNA測序 | 小動物活體成像 |
CCK8/XTT檢測 | 宏基因組測序 | 核磁共振 |
臺盼藍檢測細胞活性 | 單細胞測序 | PET-CT |
藥物篩選細胞學實驗 | circleRNA測序 | |
細胞粘附性檢測 | 甲基化測序 | 基因編輯動物 |
細胞劃痕實驗 | 條件性敲除小鼠/大鼠 | |
細胞生物學整體實驗 | 全基因敲除小鼠/大鼠 | |
細胞成管實驗 | ||
病理檢測 | CRISPR/Cas9細胞敲除/敲入 | 基因芯片 |
掃描電鏡 | 基因定點突變細胞系 | LncRNA芯片 |
透射電鏡 | 單基因敲除細胞系 | miRNA芯片 |
HE染色 | 多基因敲除細胞系 | mRNA芯片 |
免疫組化 | 目的基因敲入細胞系 | 甲基化芯片(限人和小鼠來源樣本) |
Tunel(原位末端凋亡法)檢測 | 報告基因敲入細胞系 | SNP芯片(限人和小鼠來源樣本) |
激光共聚焦 | miRNA/LncRNA敲除細胞系 | |
免疫熒光 | ||
Masson染色 | CRISPR/Cas9動物敲除/敲入 |
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原位雜交 | 基因敲除大鼠/小鼠 |
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熒光原位雜交 | 基因敲入大鼠/小鼠 | |
特殊染色(PSA、茜素紅、阿爾新藍等) |
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行為學檢測 | 藥物篩選服務項目 | 藥效學評價 |
曠場實驗 | 高通量自動藥物篩選平臺 | 抗腫瘤藥物藥效學評價 |
重復性刻板行為檢測 | 細胞高內涵藥物篩選平臺 | 心血管系統藥物藥效學評價 |
動物跑臺檢測 | 蛋白質組學靶標研發平臺 | 泌尿系統藥物藥效學評價 |
強迫游泳 | 分子藥理研究平臺 | 內分泌系統藥物藥效學評價 |
生物膜片鉗藥物篩選平臺 | 抗炎免疫藥物藥效學評價 | |
常規藥物體外篩選 |
【本平臺合作項目】
分子生物學、細胞生物學、基因敲出/入、模式動物、SPF動物保種、病理學檢測、免疫學檢測、影像學檢測、原代培養、細胞藥篩、CRISPR/Cas9基因編輯、基因芯片、高通量測序、蛋白組學、代謝組學、高通量高內涵篩選、藥效學評價、藥理毒理學實驗、慢病毒包裝與穩轉株建立、SiRNA與納米載藥、ChIP、CO-IP、生物信息學分析、知識產權服務!
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